检测试剂盒上游材料,检测试剂盒上游材料包括哪些
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arms-pcr的特点?
ARMS-PCR技术建立在等位基因特异性延伸反应基础上,只有当某个等位基因特异性引物的3’末端碱基与突变位点处碱基互补时,才能进行延伸反应。
常规PCR扩增DNA所用的上、下游引物与靶序列完全匹配,而等位基因PCR采用等位基因特异的两条上游引物,两者在3’端核苷酸不同,一个对野生型等位基因特异,另一个对突变型等位基因特异,在Taq DNA聚合酶作用下,与模板不完全匹配的上游引物将不能退火,不能生成PCR产物,而与模板匹配的引物体系则可扩增出产物,通过凝胶电泳或者qPCR就能很容易地分辨出扩增产物的有无,从而确定SNP基因型,目前市场主流为ARMS+qPCR技术,采用TaqMan探针进行检测。
(比如肿瘤靶向用药EGFR基因检测,CFDA批准的检测试剂盒,90%以上都是ARMS检测方法)
ARMS-PCR(Amplification Refractory Mutation System Polymerase Chain Reaction)是一种用于检测基因突变的特定PCR技术,具有以下特点:
1. 高度特异性:ARMS-PCR使用引物设计,其中一个引物与突变位点完全匹配,另一个引物与野生型位点完全匹配。这种设计确保了对目标突变的高度特异性鉴定,可以有效区分突变和野生型,减少假阳性结果。
2. 简单易行:ARMS-PCR仅需要使用两对引物进行扩增反应,包括一个针对野生型位点的引物对和一个针对突变位点的引物对。与其他检测技术相比,ARMS-PCR的实验步骤相对简单,易于操作。
3. 高灵敏度:由于ARMS-PCR专门针对基因突变进行设计,在合适的条件下能够非常灵敏地检测到极低水平的突变。这使得ARMS-PCR在疾病诊断、遗传病筛查和个体化药物治疗中具有潜在应用。
4. 多样性:ARMS-PCR可以应用于各种不同类型的突变检测,包括点突变、缺失突变、插入突变等。它可以用于检测单个位点的突变,也可以进行多个突变的同时检测。
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